Questão de Biologia Molecular em Biomedicina
O diagnóstico molecular representa o segmento da medicina laboratorial responsável pela detecção, pela tipagem e pela quantificação de ácidos nucleicos aplicados à genética, ao câncer e às doenças infecciosas. No que se refere aos fatores pré-analíticos, interferentes e controles de processo no diagnóstico molecular é correto afirmar que:
A
o EDTA é o anticoagulante de escolha para os testes moleculares, pois inibe as DNAses, conferindo proteção ao DNA. Contudo, como as RNAses dependem de íons bivalentes, elas podem ser inibidas pelo EDTA.
B
as análises envolvendo o DNA sofrem mais interferência de variáveis pré-analíticas do que as análises envolvendo RNA. A menor exposição das bases nitrogenadas nas estruturas secundárias formadas pelo RNA o torna menos suscetível aos ataques enzimáticos.
C
deve-se procurar congelar o sangue total-EDTA antes da extração de RNA, pois a hemólise e a lise de leucócitos provocada pelo congelamento facilitam o isolamento do botão leucocitário.
D
amostras ricas em DNA e RNA, como o sangue total, possibilitam o emprego de controles de reação endógenos. Amostras escassas em ácidos nucleicos, como plasma e urina, exigem controles de reação externos.
E
o controle de reação pode ser adicionado à amostra e analisado com o alvo principal na mesma reação (controle interno) ou em uma reação exclusiva (controle externo). Se adicionados à amostra primária (ou durante a extração), controlam apenas a amplificação.
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