Questão de Biologia Molecular em Biomedicina

Um pesquisador deseja clonar a sequência codificante de um gene de 540 pb a jusante (downstream) do promotor (200 pb) de um vetor, para subsequente expressão e purificação da proteína de interesse. Assim, o gene foi isolado como fragmento da ação da enzima de restrição SmaI (o sítio de reconhecimento dessa enzima é CCC↓GGG / a seta indica sítio de clivagem) e clonado no sítio SmaI do vetor localizado imediatamente a jusante do promotor. A sequência do gene contém um único sítio para enzima de restrição EcoRI localizada 70 pb a jusante do códon iniciador. A representação esquemática do plasmídeo a seguir indica a localização dos sítios de reconhecimento de algumas enzimas de restrição no vetor e a posição de inserção do gene de interesse. O pesquisador avaliou as colônias obtidas no processo de clonagem por meio da digestão do material com as duas enzimas de restrição HindIII e EcoRI. Qual dos seguintes padrões de digestão com essas duas enzimas de restrição representa o clone com perfil desejado pelo pesquisador para os experimentos de superexpressão?

A
~270 pb + ~470 pb + o restante da estrutura vetor
B
~540 pb + o restante da estrutura vetor
C
~200 pb + ~540 pb + o restante da estrutura vetor
D
~470 pb + o restante da estrutura vetor
E
~270 pb + ~540 pb + o restante da estrutura vetor

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