A cubeta utilizada no espectrofotômetro pode ser de quartzo, plástico ou vidro, independentemente do comprimento de onda selecionado para a análise.

Em geral, apresenta os seguintes componentes: fonte de radiação, monocromador, recipientes para soluções, detectores e indicadores de sinal.

Utiliza lâmpada de deutério para região de ultravioleta e lâmpada de tungstênio para região do visível.

O monocromador presente tem a finalidade de selecionar um comprimento de onda mais adequado para a análise.

Os espectrofotômetros UV-VIS medem a quantidade de luz emitida pela lâmpada e comparam com a quantidade de luz que atravessou a amostra contida.