Na sífilis primária, os testes imunológicos podem não apresentar reatividade no início desse estágio, pois os anticorpos começam a surgir na corrente sanguínea cerca de 7 a 10 dias após o aparecimento do cancro duro.

O primeiro teste imunológico a se tornar reagente na sífilis primária, em torno de 10 dias da evolução do cancro duro, é o VDRL.

Na sífilis secundária, todos os testes que detectam anticorpos são reagentes. Nesse estágio, espera-se encontrar títulos altos nos testes quantitativos não treponêmicos.

Na sífilis terciária, os testes que detectam anticorpos habitualmente são reagentes, principalmente os testes treponêmicos; os títulos dos anticorpos nos testes não treponêmicos tendem a ser baixos e raramente podem ser negativos.

Durante o pré-natal, todas as gestantes devem ser submetidas ao teste para o diagnóstico da sífilis em dois momentos: uma vez no primeiro trimestre de gravidez e a segunda no terceiro trimestre.