A etapa de calibração relaciona a resposta analítica do equipamento com a concentração do analito em uma determinada solução. Esta etapa ocorre posteriormente à medida da amostra e a solução utilizada apresenta concentração desconhecida.

A análise química instrumental pode ser definida como análise química que utiliza uma propriedade química do analito para monitorar a presença em uma determinada amostra ou solução padrão. Sendo a calibração opcional nesse processo quando o instrumento já é conhecido.

As soluções padrão utilizadas nos processos de calibração são substâncias de baixa pureza, instáveis quimicamente e de concentração desconhecida.

Ao realizar a calibração de um instrumento, obtemos a seguinte função y = a imes x + b, onde y representa o sinal medido pelo instrumento e x representa a concentração de analito.