É necessário um microscópio com luz polarizada para detecção dos alvos.

É um tipo de imuno-histoquímica, que pode utilizar mais de um fluorocromo, podendo ser observado mais de um alvo por reação.

Um aspecto a ser considerado é a autofluorescência natural dos tecidos.

A técnica pode utilizar anticorpos monoclonais ou policlonais e pode ser direta ou indireta.