A esterilização pelo gás óxido de etileno é o método de escolha para esterilização de medicamentos que não resistem a altas temperaturas, como no processamento por calor seco ou calor úmido. Esse método é frequentemente utilizado por ser considerado altamente seguro e incapaz de deixar resíduos tóxicos nos materiais tratados.

A filtração é empregada para esterilização de soluções termossensíveis por remoção física dos microrganismos contaminantes. A filtração para fins de esterilização é, normalmente, realizada com membranas de graduação de tamanho de poro nominal de 0,3 \, ext{µm}, ou menor.

O calor é o agente esterilizante mais simples, econômico e seguro de que se dispõe, contudo a sensibilidade dos diferentes microrganismos à ação do calor é bastante variada, sendo as formas esporuladas as menos resistentes.

O processo de esterilização empregando vapor saturado sob pressão é realizado em câmara denominada autoclave. Para esse método de esterilização, a condição de referência para esterilização de preparações aquosas é de aquecimento de, no mínimo, 121 \, °C por, pelo menos, 15 \, ext{minutos}. Combinações distintas de tempo e temperatura podem ser utilizadas, contanto que validadas e que demonstrem a eficácia do processo escolhido.

A esterilização térmica por calor seco é realizada em estufa com distribuição homogênea do calor, que pode ser obtida por circulação forçada de ar. As cepas de ext{Geobacillus stearothermophilus} são as mais recomendadas para serem utilizadas como indicador biológico nos processos de validação e monitorização desse método.