o agente diferenciador, nesse tipo de coloração, é a mistura álcool + fucsina.

em algumas células, o agente diferenciador consegue penetrar na célula, tornando-a azul.

bactérias GRAM negativas ficam vermelhas, pois permitem entrada do agente diferenciador.

a fucsina diluída, quando aplicada nesse tipo de coloração, deixa as bactérias com a coloração azulada.

o tempo de aplicação da substância violeta de genciana, nesse tipo de coloração, é de cerca de três minutos.