O tempo e a temperatura de incubação são fatores que interferem na difusão em ágar.

O método turbidimétrico baseia-se na inibição do crescimento microbiano medido, por meio da turbidez da suspensão de micro-organismos sensíveis ao composto contido em um meio com antibiótico.

A maneira como o antibiótico é colocado em contato com o meio de cultura define as seguintes técnicas utilizadas para difusão em ágar: técnica de cilindros em placas, técnica de orifícios ou pocinhos, técnica de discos de papel e técnica de gotas ou depósito em superfície.

A turbidimitria é um método rápido, porém uma das desvantagens é que o pH pode influenciar o crescimento do micro-organismo.

Na difusão em ágar por discos de papel, os discos de papel devem ter ao menos 30 mm de diâmetro.