Adição da enzima de restrição deve ocorrer na fase de anelamento da PCR.

As enzimas de restrição são obtidas através de células humanas.

Sempre após a clivagem de uma enzima de restrição será gerado dois fragmentos de DNA.

Reconhecer uma sequência inespecífica e clivar sempre na metade da sequência reconhecida, gerando dois fragmentos com tamanhos exatamente iguais.

Reconhecer uma sequência específica e clivar em uma determinada posição.