A reação de imunofluorescência indireta (RIFI) é o teste padrão para diagnóstico da ocorrência ou não de anticorpos de Leishmania sp, apresentando alta sensibilidade principalmente em cães assintomáticos.

O ELISA é utilizado principalmente para a detecção do antígeno para levantamento epidemiológico, menos oneroso e rápido. É conhecido por seu maior grau de sensibilidade.

O método de imunoistoquímica não é um bom método de diagnóstico para Leishmania sp. Apesar de ser simples, ele não diminui as reações cruzadas com outros tripanossomídeos se comparado com o teste histoquímico de rotina.

O método parasitológico pela pesquisa direta da forma amastigota em esfregaço de punção aspirativa de linfonodos e medula óssea, corado por Giemsa, apresenta alta especificidade, sendo um bom método complementar no diagnóstico da Leishmania sp.