O processo de replicação in vitro, depende do uso de primers (oligonucleotídeos sintéticos), com sequências de 18 a 22 nucleotídeos, que seja complementar ao gene de interesse.

O processo do PCR não necessita da utilização de nucleotídeos.

A ligação dos primers à fita de DNA é denominado como desnaturação.

A enzima DNA polimerase humana é uma das principais responsáveis pelo sucesso da técnica in vitro.